ALKALINE PHOSPHATASE

CALIBRATION WASTE MANAGEMENT

Cat. No. Pack Name Packaging (Content) Calibration with calibrator XL MULTICAL, Cat. No. XSYS0034 is recommended. Please refer to local legal requirements.
BLT00003 ALP AMP 150 R1: 4 x 30 ml, R2: 1 x 30 ml
QUALITY CONTROL ASSAY PROCEDURE
BLT00004 ALP AMP 500 R1: 4 x 100 ml, R2: 1 x 100 ml For quality control ERBA NORM, Cat. No. BLT00080 and ERBA PATH, Cat. No. BLT00081 are Wavelength: 420 (405–430) nm
recommended. Cuvette: 1 cm
Two reagents method – substrate start
UNIT CONVERSION
Reagent blank Calibrator Sample
U/l x 0.017 = µkat/l
INTENDED USE Reagent 1 0.800 ml 0.800 ml 0.800 ml
Diagnostic reagent for quantitative in vitro determination of ALP in human serum or plasma.
EXPECTED VALUES 4 Sample – – 0.020 ml
CLINICAL SIGNIFICANCE at 37°C
Human ALP consists of a group of enzymes which hydrolyse phosphates at an alkaline pH. Females: 4–15 years: 54–369 U/l Calibrator – 0.020 ml –
ALP is found in practically all tissues of the body but in high concentrations in the osteoblasts 20–50 years: 42– 98 U/l Distilled water 0.020 ml – –
of bone, liver, placenta, kidney, intestinal wall and lactating mammary glands. In adults the ≥ 60 years: 53–141 U/l
ALP normally found circulating in the serum is largely derived from the liver. In children or in Mix and after 5 min. incubation (at 37 °C) add:
Males: 1–12 years: 54–369 U/l
adolescents going through pubertal growth spurts, there is an additional contribution from bone 20–50 years: 53–128 U/l Reagent 2 0.200 ml 0.200 ml 0.200 ml
and this accounts for the higher reference interval for these groups. Pregnancy also raises the ≥ 60 years: 56–119 U/l
normal values of ALP. It is recommended that each laboratory verify this range or derives reference interval for Mix, incubate 1 min. at 37 °C and then measure the initial absorbance of calibrator and sample
Raised ALP levels are often observed in bone disease or liver disease involving the biliary tract. the population it serves. against reagent blank. Measure the absorbance change exactly after 1, 2 and 3 min. Calculate
If the source of the isoenzyme is not apparent then estimation of GGT may help differentiate 1 minute absorbance change (ΔA/min).
between the two. A raised GGT in the presence of a raised ALP would suggest the liver is the PERFORMANCE DATA Monoreagent method – sample start
primary source. Data contained within this section is representative of performance on ERBA XL systems. Data
Increased ALP (usually normal GGT) is seen in Osteomalacia and Rickets, primary hyperpa- obtained in your laboratory may differ from these values. Reagent blank Calibrator Sample
rathyroidism with bone involvement, Pagets disease, secondary carcinoma in bone and some Working reagent 1.000 ml 1.000 ml 1.000 ml
cases of osteogenic sarcoma. Increased levels of ALP (usually with a raised GGT) is seen in Limit of quantification: 4.5 U/l
cholestasis, hepatitis, cirrhosis, space occupying lesions and malignancy with bone or liver Linearity: 1300 U/l Sample – – 0.020 ml
involvement or direct production. Low levels of ALP may be observed in conditions which cause Measuring range: 4.5–1300 U/l
Calibrator – 0.020 ml –
arrested bone growth or in hypophosphatasia.
Intra-assay precision Mean SD CV Distilled water 0.020 ml – –
PRINCIPLE Within run (n=20) (U/l) (U/l) (%)
The method according to IFCC recommendation. This method utilises 4-nitrophenyl phosphate Mix, incubate 1 min. at 37 °C and then measure the initial absorbance of calibrator and sample
Sample 1 84.2 0.58 0.69
as the substrate. Under optimised conditions ALP present in the sample catalyses the following against reagent blank. Measure the absorbance change exactly after 1, 2 and 3 min. Calculate
reaction. Sample 2 217.8 2.34 1.07 1 minute absorbance change (ΔA/min).
ALP
AMP + 4-NPP + H2O 4-nitrophenol + phosphate Inter-assay precision Mean SD CV CALCULATION
Mg 2+ / Alkaline pH Run to run (n=20) (U/l) (U/l) (%) Δ Asam /min.
At the pH of the reaction, 4-nitrophenol has an intense yellow colour. The reagent also contains 1. ALP (U/l) = x Ccal Ccal = calibrator concentration
Sample 1 84.6 1.98 2.34 Δ Acal /min.
a metal ion buffer system to ensure that optimal concentrations of Zinc and Magnesium are
maintained. The metal ion buffer can also chelate other potentially inhibitory ions which may be Sample 2 205.2 2.80 1.37 2. Using factor:
present. The reaction is monitored by measuring the rate of increase in absorbance at 405 or ALP (U/l) = f x ΔA/min
415 nm which is proportional to the activity of ALP in the serum. f = factor f = 2764 (at 405 nm)
COMPARISON
REAGENT COMPOSITION A comparison between XL-Systems ALP (y) and a commercially available test (x) using 40 Applications for automatic analysers are available on request.
R1 samples gave following results:
AMP buffer, pH 10.4 434 mmol/l ASSAY PARAMETERS FOR PHOTOMETERS
y = 0.965 x–1.68 U/l
Magnesium acetate 2.48 mmol/l Mode Kinetic
r = 0.998
Zinc sulfate 1.24 mmol/l
HEDTA 2.48 mmol/l Wavelength (nm) 405
INTERFERENCES
R2 Sample Volume (μl) 10/20
Following substances do not interfere:
p-nitrophenyl phosphate 81.6 mmol/l
haemoglobin up to 5 g/l, bilirubin up to 40 mg/dl, triglycerides up to 2000 mg/dl. Working Reagent Volume (μl) 500/1000
REAGENT PREPARATION
Reagent is liquid, ready to use. WARNING AND PRECAUTIONS Lag time (sec.) 60

STABILITY AND STORAGE For in vitro diagnostic use. To be handled by entitled and professionally educated person. Kinetic interval (sec.) 60
The unopened reagents are stable till the expiry date stated on the bottle and kit label when Reagent R2 also contains < 0.7 % KOH and is classified as irritant. No. of readings 3
stored at 2–8°C.
Kinetic factor 2764
Two reagents method – substrate start
Reagents are ready to use. After opening, reagents are stable until expiry date at 2–8°C if sto- Reaction temperature (°C) 37
red at appropriate conditions, closed carefully and without any contamination. Reaction direction Increasing
Maximum allowable absorbance of the working reagent measured at 420 nm against distilled
water is 1.0 Normal Low U/l 42
Monoreagent method – sample start Warning Normal High U/l 128
Mix 4 portion of reagent R1 with 1 portion of reagent R2. Hazard statement:
Stability: 1 week at 15–25 °C in dark H315 Causes skin irritation. Linearity Low U/l 4.5
4 weeks at 2–8 °C in dark H319 Causes serious eye irritation. Linearity High U/l 1300
SPECIMEN COLLECTION AND HANDLING Precautionary statement:
Blank with Reagent
Use serum, plasma (heparin, EDTA). P280 Wear protective gloves/protective clothing/eye protection.
It is recommended to follow NCCLS procedures (or similar standardized conditions). P302+P352 IF ON SKIN: Wash with plenty of water. Absorbance limit (max.) 1.4
Stability in serum / plasma: 4
hours at 20–25 °C P305+P351+P338 IF IN EYES: Units U/l
3 days at 4–8 °C Rinse cautiously with water for several minutes. Remove contact lenses, if present and easy
2 months at -20 °C to do. Continue rinsing.
Discard contaminated specimens.
QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Date of revision: 20. 3. 2018

ЩЕЛОЧНАЯ ФОСФАТАЗА (ЩФ)
Контроль качества Утилизация использованных материалов
Кат. № Название на упаковке Фасовка Для проведения контроля качества рекомендуются контрольные сыворотки: ЭРБА В соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида
BLT00003 ЩФ АМП 150 R1: 4 х 30 мл, R2: 1 x 30 мл НОРМА, Кат. No. BLT00080, ЭРБА ПАТОЛОГИЯ, Кат. No. BLT00081. материала.

BLT00004 ЩФ АМП 500 R1: 4 х 100 мл, R2: 1 x 100 мл Коэффициент пересчета Проведение анализа
Е/л х 0,017 = мккат/л Длина волны: 420 (405-430) нм
Нормальные величины 4 Оптический путь: 1 см
Сыворотка / Плазма 37°C Температура: 37 оС

Применение Девочки 4–15 лет 54–369 Е/л Двухреагентный метод – старт субстратом
Реагент предназначен для in vitro диагностики щелочной фосфатазы в сыворотке Женщины 20–50 лет ≥ 60 лет
Образец / Калибратор 0,020 мл
и плазме. Мальчики 1–12 лет 54–369 Е/л
Клиническое значение Мужчины 20–50 лет 53–128 Е/л Реагент 1 (буфер) 0,800 мл
Щелочная фосфатаза содержится в высокой концентрации в печени, в костях, плаценте, ≥ 60 лет 56–119 Е/л
Приведенные диапазоны величин следует рассматривать как ориентировочные. Смешать, инкубировать 5 мин. при 37 оС, добавить
в кишечнике, злокачественных опухолях.
Норма: Физиологическое повышение щелочной фосфатазы в сыворотке бывает Каждой лаборатории необходимо определять свои диапазоны. Реагент 2 (субстрат) 0,200 мл
у беременных женщин и у растущих детей. Значения величин
Повышение активности щелочной фосфатазы (при нормальной активности GGT) Смешать, инкубировать 1 мин при 37 С, измерить поглощение Аст./обр. против
о
Значения нормальных величин были получены на автоматических анализаторах серии
наблюдается при заболеваниях печени, заболеваниях костей (рахит, остеомаляция, реагента бланк. Измерить поглощение точно через 1, 2 и 3 минуты. Рассчитайте
ERBA XL. Результаты могут отличаться, если определение проводили на другом типе
лимфогранулематоз, саркома), при болезни Hodgkins или при закупорке и остановке среднее изменение поглощения в минуту (ΔА).
анализатора.
сердца.
Монореагентный метод – старт образцом
Повышение активности щелочной фосфатазы (при повышенной активности GGT) Рабочие характеристики
наблюдается при гепатите, циррозе, холестазе, злокачественных новообразованиях Чувствительность 4,5 Е/Л Образец / Калибратор 0,020 мл
в костях и печени. Линейность: до 1300 Е/л
Снижение уровня наблюдается при недостаточном питании. Диапазон измерений: 4,5–1300 Е/л Рабочий раствор 1,000 мл
Воспроизводимость 37°C
Принцип реакции Смешать, инкубировать 1 мин при 37 оС, измерить поглощение Аст./обр. против реагента
В соответствии с рекомендациями IFCC (Международное Общество Клинической Химии) Среднеарифметическое SD CV бланк. Измерить поглощение точно через 1, 2 и 3 минуты. Рассчитайте среднее изменение
Внутрисерийная N поглощения в минуту (ΔА).
2-амино-2-метил-1-пропанол + пара-нитрофенилфосфат + H2O значение (Е/л) (Е/л) (%)
ЩФ Образец 1 20 84,2 0,58 0,69 Расчеты
4-нитрофенол + 2-амино-2-метил-1-пропанол фосфат Рассчитайте активность ЩФ в пробе, используя
Mg 2+/Щелочной pH Образец 2 20 217,8 2,34 1,07 1. Калибратор
ЩФ: Щелочная Фосфатаза ΔАобр
ЩФ (Е/л) = Скал x Cкал. – активность ЩФ в калибраторе
Скорость образования окрашенного 4-нитрофенола пропорциональна активности щелочной Среднеарифметическое SD CV ΔАкал
фосфатазы и измеряется по изменению поглощения при 405–415 нм. Межсерийная N
значение (Е/л) (Е/л) (%)
Состав реагентов 2. Факторы:
Образец 1 20 84,6 1,98 2,34
R1 ЩФ (Е/л) = Ф x ΔA/мин
2-амино-2-метил-1-пропанол (АМП) буфер рН 10,4 434 ммоль/л Образец 2 20 205,2 2,80 1,37 Ф – фактор пересчета = 2764 (при 405 нм)
Mg ацетата 2,48 ммоль/л
Zn сульфата 1,24 ммоль/л Сравнение методов Протоколы для использования на автоматических анализаторах могут быть
HEDTA 2,48 ммоль/л Сравнение было проведено на 40 образцах с использованием реагентов серии БЛТ: получены по запросу.
R2 ЩФ(у) и имеющихся в продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х).
p-паранитрофенилфосфат 81,6 ммоль/л Результаты: y = 0,965 x - 1,68 Е/л r = 0,998 Параметры для проведения анализа на полуавтоматическом анализаторе

Приготовление рабочих реагентов Специфичность / Влияющие вещества Метод Кинетика

Реагенты R1 и R2 жидкие, готовые к использованию. Гемоглобин до 5 г/дл, билирубин до 40 мг/дл и триглицериды до 2000 мг/дл не влияют Длина волны 1 (нм) 405
на результаты анализа.
Хранение и стабильность Объем образца (мкл) 10/20
Двухреагентный метод – старт субстратом Предупреждения и меры предосторожности
Объем реагента (мкл) 500/1000
Не вскрытые реагенты (R1 и R2) стабильны до достижения указанного срока годности, Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным
если хранятся при 2–8°C. лаборантом. Реагент R2 также содержит < 0,7 % KOH и классифицируется как Задержка (Сек.) 60
После вскрытия: до максимальной абсорбции рабочего реагента равной 1, при 420 нм, раздражитель. Интервал измерения (Сек.) 60
против дист. воды.
Монореагентный метод – старт образцом Кол-во замеров 3
Смешать 4 части R1 с 1 частью R2 Фактор 2764
Стабильность:
1 неделя при 15–25 °C в темном месте Температура реакции (°C) 37
4 недели при 2–8 °C в темном месте Направление реакции Увеличение
Предупреждение
Образцы Обозначение опасности: Нижний предел нормы (Е/л) 42
Сыворотка или плазма (гепарин, ЭДТА) H315 Вызывает раздражение кожи. Верхний предел нормы (Е/л) 128
Исследование проводить в соответствии с протоколом NCCLS (или аналогов). H319 Вызывает серьезное раздражение глаз.
Нижний предел линейности (Е/л) 4,5
Стабильность: Меры предосторожности:
В сыворотке/плазме: P280 Пользоваться защитными перчатками/защитной одеждой/ средствами защиты Верхний предел линейности (Е/л) 1300
4 часа при 20–25°C глаз. Мин. Начальное поглощение 1,4
3 дня при 4–8°C P302+P352 ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ: Промыть большим количеством воды.
2 месяца при -20°C P305+P351+P338 ПРИ ПОПАДАНИИ В ГЛАЗА: Осторожно промыть глаза водой в Бланк Реагент
Допускается одноразовое замораживание. течение нескольких минут. Снять контактные линзы, если вы пользуетесь ими и если Единицы Е/л
Загрязненные образцы не использовать. это легко сделать. Продолжить промывание глаз.

Калибровка
Мы рекомендуем для калибровки использовать XL МУЛЬТИКАЛ, Кат. No. XSYS0034.
QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Дата проведения контроля: 20. 3. 2018

 ALKALINE PHOSPHATASE
Stabilita ALP v séru, plazmě: Standardní věty o nebezpečnosti:
Kat. č. Název balení Obsah balení 4 hodiny při 20–25°C H315 Dráždí kůži.
BLT00003 ALP AMP 150 R1: 4 x 30 ml, R2: 1 x 30 ml 3 dny při 4–8°C H319 Způsobuje vážné podráždění očí.
2 měsíce při –20°C Pokyny pro bezpečné zacházení:
BLT00004 ALP AMP 500 R1: 4 x 100 ml, R2: 1 x 100 ml Nepoužívejte kontaminované vzorky. P280 Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ochranné brýle.
P302+P352 PŘI STYKU S KŮŽI: Omyjte velkým množstvím vody.
KALIBRACE
P305+P351+P338 PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně vyplachujte vodou. Vyjměte
Ke kalibraci se doporučuje Lyonorm Kalibrátor, kat. č. BLT00069.
kontaktní čočky, jsou-li nasazeny a pokud je lze vyjmout snadno. Pokračujte ve vyplachování.
POUŽITÍ KONTROLA KVALITY
Diagnostická souprava pro kvantitativní in vitro stanovení katalytické koncentrace ALP (alkalic- PRVNÍ POMOC
Ke kontrole se doporučuje Lyonorm HUM N, kat. č. BLT00070 a Lyonorm HUM P, kat. č.
ké fosfatasy) v séru a plazmě. Při náhodném požití vypláchnout ústa a vypít asi 0,5 l vody, při vniknutí do oka provést rychlý
BLT00071.
a důkladný výplach proudem čisté vody. Při potřísnění omýt pokožku teplou vodou a mýdlem.
KLINICKÝ VÝZNAM PŘEPOČET JEDNOTEK Ve vážných případech poškození zdraví vyhledat lékařskou pomoc.
Lidská ALP představuje skupinu hydrolytických enzymů působících při alkalickém pH. Vyskytu- U/l x 0,017 = µkat/l NAKLÁDÁNÍ S ODPADY
je se prakticky ve všech tkáních, ve vysokých koncentracích v osteoblastech, játrech, placentě,
REFERENČNÍ HODNOTY 4 Na všechny zpracované vzorky je nutno pohlížet jako na potencionálně infekční a spolu s pří-
ledvinách, ve střevech a mléčných žlázách. Fyziologické zvýšení katalytické koncentrace ALP
fS ALP (µkat/l) 37°C padnými zbytky činidel je likvidovat podle vlastních interních předpisů jako nebezpečný odpad
se vyskytuje u dětí a adolescentů při růstu kostí a během těhotenství.
muži 0,67–2,15 v souladu se Zákonem o odpadech.
Zvýšené hladiny ALP často souvisí s onemocněním kostí nebo jater, včetně žlučového traktu.
ženy 0,58–1,74 Papírové a ostatní obaly se likvidují podle druhu materiálu jako tříděný odpad (papír, sklo,
Zvýšená činnost ALP je také pozorována u všech forem cholestázy, u Pagetovy choroby, hyper-
děti (chlapci od 13 do 17 let) < 6,15 plasty).
parathyreoidismu, křivice, osteomalacie či kostních tumorech.
děti (dívky od 13 do 17 let) < 3,11 POSTUP MĚŘENÍ
PRINCIP METODY novorozenci < 4,17 Vlnová délka 420 (405–430) nm
Toto metoda vychází z doporučení IFCC Referenční rozmezí je pouze orientační, doporučuje se, aby si každá laboratoř ověřila Kyveta 1 cm
ALP rozsah referenčního intervalu pro populaci, pro kterou zajišťuje laboratorní vyšetření. Teplota 37°C
AMP + 4-NPP + H2O 4-nitrofenol + fosfát
Mg / alkalické pH
2+ Objemový poměr sérum/reakční směs 1/51
VÝKONNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY
Výkonnostní charakteristiky byly získány na automatických analyzátorech ERBA XL. Data zís- Objem pracovních roztoků a vzorků lze měnit, pro garanci analytických parametrů však musí
Alkalická fosfatasa (alkalická fosfohydrolasa monoesterů kyseliny orthofosforečné, EC 3.1.3.1.
kaná ve vaší laboratoři se mohou od těchto hodnot lišit. být jejich vzájemný poměr zachován.
– ALP) štěpí v alkalickém prostředí 4-nitrofenylfosfát na 4-nitrofenol a fosfát. Mírou katalytické
koncentrace enzymu je množství uvolněného 4-nitrofenolu, který se stanovuje fotometricky ki- Dolní mez stanovitelnosti: 0,075 µkat/l Dvoureagenční metoda – start substrátem
netickým postupem. Linearita: do 22 µkat/l
Reagenční blank Kalibrátor Vzorek
Pracovní rozsah: 0,075–22 µkat/l
SLOŽENÍ ČINIDEL Činidlo 1 0,800 ml 0,800 ml 0,800 ml
PŘESNOST
R1 ČINIDLO Vzorek – – 0,020 ml
AMP pufr (pH 10,4) 434 mmol/l Intra-assay (n=20) Průměr (µkat/l) SD (µkat/l) CV (%)
Kalibrátor – 0,020 ml –
Octan hořečnatý 2,48 mmol/l Vzorek 1 1,43 0,010 0,69
Síran zinečnatý 1,24 mmol/l Destilovaná voda 0,020 ml – –
Vzorek 2 3,63 0,039 1,07
HEDTA 2,48 mmol/l Promíchá se a po inkubaci 5 min (37°C) se přidá:
R2 ČINIDLO Inter-assay (n=20) Průměr (µkat/l) SD (µkat/l) CV (%) Činidlo 2 0,200 ml 0,200 ml 0,200 ml
4-nitrofenylfosfát 81,6 mmol/l
Vzorek 1 1,41 0,033 2,34 Promíchá se, inkubuje se 1 minutu při 37°C a poté se měří absorbance vzorku (ΔAvz) a ka-
SLOŽENÍ REAKČNÍ SMĚSI Vzorek 2 3,42 0,047 1,37 librátoru (ΔAkal) proti reagenčnímu blanku v jednominutových intervalech po dobu 3 minut.
AMP pufr (pH 10,4) 340 mmol/l Vypočítá se průměrná změna absorbance ΔA za 1 minutu (ΔA/min).
Octan hořečnatý 1,95 mmol/l SROVNÁNÍ S KOMERČNĚ DOSTUPNOU METODOU Jednoreagenční metoda – start vzorkem
Síran zinečnatý 0,97 mmol/l Lineární regrese:
HEDTA 1,95 mmol/l N = 40 Reagenční blank Kalibrátor Vzorek
4-nitrofenylfosfát 16,0 mmol/l r = 0,998 Pracovní roztok 1,000 ml 1,000 ml 1,000 ml
y = 0,965 x - 0,028 µkat/l
PŘÍPRAVA PRACOVNÍCH ROZTOKŮ Vzorek – – 0,020 ml
Činidla jsou kapalná, připravená k použití. INTERFERENCE Kalibrátor – 0,020 ml –
Následující analyty neinterferují:
SKLADOVÁNÍ A STABILITA PRACOVNÍCH ROZTOKŮ Destilovaná voda 0,020 ml – –
hemoglobin do 5 g/l, bilirubin do 40 mg/dl, triglyceridy do 2000 mg/dl
Dvoureagenční metoda – start substrátem
Činidla R1 a R2 jsou kapalná a určená k přímému použití. Pokud jsou činidla skladována Promíchá se, inkubuje se 1 minutu při 37°C a poté se měří absorbance vzorku (ΔAvz) a kalibrá-
BEZPEČNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY
před i po otevření při 2–8 °C a chráněna před světlem a kontaminací, jsou stabilní do data toru (ΔAkal) proti reagenčnímu blanku v jednominutových intervalech po dobu 3 minut. Vypočítá
Určeno pro in vitro diagnostické použití oprávněnou a odborně způsobilou osobou.
exspirace uvedeného na obalu. se průměrná změna absorbance ΔA za 1 minutu (ΔA/min).
Činidlo R2 obsahuje < 0,7 % žíravého hydroxidu draselného a je klasifikované jako dráž-
divé. VÝPOČET
Jednoreagenční metoda – start vzorkem
ΔAvz/min
Pracovní roztok se připraví smícháním 4 dílů činidla R1 s 1 dílem činidla R2. Alkalická fosfatasa (μkat/l) = x Ckal
Stabilita: 1 týden při 15–25 °C v temnu ΔAkal /min
4 týdny při 2–8 °C v temnu Ckal = koncentrace kalibrátoru
Maximální přípustná absorbance pracovního roztoku je 1,0 při 420 nm proti destilované
vodě. Varování Aplikace na automatické analyzátory jsou dodávány na vyžádání.
VZORKY
Sérum, plazma (EDTA, heparin).
Doporučujeme postupovat dle NCCLS (nebo podobných standardů).

QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Datum revize: 20. 3. 2018

 ALKALINE PHOSPHATASE
Stabilita ALP v sére, plazme: Bezpečnostné upozornenie:
Kat. č. Názov balenia Obsah balenia
4 hodiny pri 20–25°C P280 Noste ochranné rukavice/ochranný odev/ochranné okuliare.
BLT00003 ALP AMP 150 R1: 4 x 30 ml, R2: 1 x 30 ml 3 dni pri 4–8°C P302+P352 PRI KONTAKTE S POKOŽKOU: Umyte veľkým množstvom vody.
2 mesiace pri -20°C P305+P351+P338 PO ZASIAHNUTÍ OČÍ: Niekoľko minút ich opatrne vyplachujte vodou. Ak
BLT00004 ALP AMP 500 R1: 4 x 100 ml, R2: 1 x 100 ml
Nepoužívajte kontaminované vzorky. používate kontaktné šošovky a ak je to možné, odstráňte ich. Pokračujte vo vyplachovaní.
KALIBRÁCIA PRVÁ POMOC
Na kalibráciu sa doporučuje Lyonorm Kalibrátor, kat. č. BLT00069. Pri náhodnom požití vypláchnuť ústa a vypiť asi 0,5 l vody, pri vniknutí do oka vykonať rýchly a
POUŽITIE KONTROLA KVALITY dôkladný výplach prúdom čistej vody. Pri postriekaní umyť pokožku teplou vodou a mydlom. Vo
Diagnostická súprava na kvantitatívne in vitro stanovenie katalytickej koncentrácie ALP (alka- Na kontrolu sa doporučuje Lyonorm HUM N, kat. č. BLT00070 a Lyonorm HUM P, kat. č. vážnych prípadoch poškodenia zdravia vyhľadať lekársku pomoc.
lickej fosfatázy) v sére a plazme. BLT00071. NAKLADANIE S ODPADMI
KLINICKÝ VÝZNAM PREPOČET JEDNOTIEK Všetky spracované vzorky je nutné považovať ako potenciálne infekčné a spolu s prípadnými
Ľudská ALP predstavuje skupinu hydrolytických enzýmov pôsobiacich pri alkalickom pH. Vy- U/l x 0,017 = µkat/l zvyškami činidiel ich likvidovať podľa vlastných interných predpisov ako nebezpečný odpad v
skytuje sa prakticky vo všetkých tkanivách, vo vysokých koncentráciách v osteoblastoch, pe- súlade so Zákonom o odpadoch.
REFERENČNÉ HODNOTY 4 Papierové a ostatné obaly sa likvidujú podľa druhu materiálu ako triedený odpad (papier, sklo,
čeni, placente, obličkách, v črevách a mliečnych žľazách. Fyziologické zvýšenie katalytickej
fS ALP (µkat/l) 37°C plasty).
koncentrácie ALP se vyskytuje u detí a adolescentov pri raste kostí a behom tehotenstva.
muži 0,67–2,15
Zvýšené hladiny ALP často súvisia s ochorením kostí alebo pečene vrátane žlčového traktu. POSTUP MERANIA
ženy 0,58–1,74
Zvýšená činnosť ALP je tiež pozorovaná u všetkých foriem cholestázy, u Pagetovej choroby, Vlnová dĺžka 420 (405–430) nm
deti (chlapci od 13 do 17 rokov) < 6,15
hyperparathyreoidizmu, krivice, osteomalácie či kostných tumoroch. Kyveta 1 cm
deti (dievčatá od 13 do 17 rokov) < 3,11
novorodenci < 4,17 Teplota 37°C
PRINCÍP METÓDY
Referenčné rozmedzie je iba orientačné, doporučuje sa, aby si každé laboratórium ove- Objemový pomer sérum/reakčná zmes 1/51
Táto metóda vychádza z doporučenia IFCC
rilo rozsah referenčného intervalu pre populáciu, pre ktorú zabezpečuje laboratórne vy- Objem pracovných roztokov a vzoriek možno meniť, pre garanciu analytických parametrov
ALP
šetrenie. však musí byť ich vzájomný pomer zachovaný.
AMP + 4-NPP + H2O 4-nitrofenol + fosfát
Mg / alkalické pH
2+
VÝKONNOSTNÉ CHARAKTERISTIKY Dvojreagenčná metóda – štart substrátom
Alkalická fosfatáza (alkalická fosfohydroláza monoesterov kyseliny orthofosforečnej, EC Výkonnostné charakteristiky boli získané na automatických analyzátoroch ERBA XL. Údaje zís- Reagenčný blank Kalibrátor Vzorka
3.1.3.1. – ALP) štiepi v alkalickom prostredí 4-nitrofenylfosfát na 4-nitrofenol a fosfát. Mierou kané vo vašom laboratóriu sa môžu od týchto hodnôt líšiť.
Dolná medza stanoviteľnosti: 0,075 µkat/l Činidlo 1 0,800 ml 0,800 ml 0,800 ml
katalytickej koncentrácie enzýmu je množstvo uvoľneného 4-nitrofenolu, ktorý sa stanovuje fo-
tometricky kinetickým postupom. Linearita: do 22 µkat/l Vzorka – – 0,020 ml
Pracovný rozsah: 0,075–22 µkat/l
ZLOŽENIE ČINIDIEL Kalibrátor – 0,020 ml –
PRESNOSŤ
R1 ČINIDLO Destilovaná voda 0,020 ml – –
AMP pufer (pH 10,4) 434 mmol/l Intra-assay (n=20) Priemer (µkat/l) SD (µkat/l) CV (%)
Premieša sa a po inkubácii 5 min (37°C) sa pridá:
Octan horečnatý 2,48 mmol/l Vzorka 1 1,43 0,010 0,69
Činidlo 2 0,200 ml 0,200 ml 0,200 ml
Síran zinočnatý 1,24 mmol/l Vzorka 2 3,63 0,039 1,07
HEDTA 2,48 mmol/l Premieša sa, inkubuje sa 1 minútu pri 37°C a potom sa odmeria absorbancia vzorky (ΔAvz)
a kalibrátora (ΔAkal) oproti reagenčnému blanku v jednominútových intervaloch po dobu 3
R2 ČINIDLO Inter-assay (n=20) Priemer (µkat/l) SD (µkat/l) CV (%)
minút. Vypočíta sa priemerná zmena absorbancie ΔA za 1 minútu (ΔA/min).
4-nitrofenylfosfát
81,6 mmol/l Vzorka 1 1,41 0,033 2,34
Jednoreagenčná metóda – štart vzorkou
ZLOŽENIE REAKČNEJ ZMESI Vzorka 2 3,42 0,047 1,37
AMP pufer (pH 10,4) 340 mmol/l Reagenčný blank Kalibrátor Vzorka
Octan horečnatý 1,95 mmol/l POROVNANIE S KOMERČNE DOSTUPNOU METÓDOU Pracovný roztok 1,000 ml 1,000 ml 1,000 ml
Síran zinočnatý 0,97 mmol/l Lineárna regresia:
Vzorka – – 0,020 ml
HEDTA 1,95 mmol/l N = 40
4-nitrofenylfosfát
16,0 mmol/l r = 0,998 Kalibrátor – 0,020 ml –
y = 0,965 x - 0,028 µkat/l Destilovaná voda 0,020 ml – –
PRÍPRAVA PRACOVNÝCH ROZTOKOV
Činidlá sú kvapalné, pripravené na použitie. INTERFERENCIE Premieša sa, inkubuje sa 1 minútu pri 37°C a potom sa odmeria absorbancia vzorky (ΔAvz) a
Nasledujúce analyty neinterferujú: kalibrátora (ΔAkal) oproti reagenčnému blanku v jednominútových intervaloch po dobu 3 minút.
SKLADOVANIE A STABILITA PRACOVNÝCH ROZTOKOV hemoglobín do 5 g/l, bilirubín do 40 mg/dl, triglyceridy do 2000 mg/dl Vypočíta sa priemerná zmena absorbancie ΔA za 1 minútu (ΔA/min).
Dvojreagenčná metóda – štart substrátom
BEZPEČNOSTNÉ CHARAKTERISTIKY VÝPOČET
Činidlá R1 a R2 sú kvapalné a určené na priame použitie. Ak sú skladované pred i po otvo-
Určené na in vitro diagnostické použitie oprávnenou a odborne spôsobilou osobou. ΔAvz/min
rení pri 2–8 °C a chránené pred svetlom a kontamináciou, sú stabilné do dátumu expirácie Alkalická fosfatáza (μkat/l) = x Ckal
Činidlo R2 obsahuje < 0,7 % žieravého hydroxidu draselného a je klasifikované ako dráž-
uvedeného na štítku. ΔAkal /min
divé.
Jednoreagenčná metóda – štart vzorkou Ckal = koncentrácia kalibrátora
Pracovný roztok sa pripraví zmiešaním 4 dielov činidla R1 s 1 dielom činidla R2.
Aplikácie na automatické analyzátory sú dodávané na vyžiadanie.
Stabilita: 1 týždeň pri 15–25 °C v tme
4 týždne pri 2–8 °C v tme
Maximálne prípustná absorbancia pracovného roztoku je 1,0 pri 420 nm oproti destilovanej
vode. Pozor
Výstražné upozornenie:
VZORKY
H315 Dráždi kožu.
Sérum, plazma (EDTA, heparín).
Doporučujeme postupovať podľa NCCLS (alebo podobných štandardov). H319 Spôsobuje vážne podráždenie očí.

QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Dátum revízie: 20. 3. 2018

FOSFATASA ALCALINA
MANIPULACIÓN Y RECOGIDA DE MUESTRAS MANEJO DE RESIDUOS
Catalogo. No. Nombre del paquete Presentación (contenido) Por favor consulte los requisitos legales locales.
Use suero, plasma (heparina, EDTA).
BLT00003 ALP AMP 150 R1: 4 x 30 ml, R2: 1 x 30 ml Se recomienda seguir los procedimientos de NCCLS (o similares condiciones estandarizadas).
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
Estabilidad en suero / plasma: 4 horas a 20–25°C
BLT00004 ALP AMP 500 R1: 4 x 100 ml, R2: 1 x 100 ml Longitud de onda: 420 (405–430) nm
3 dias a 4–8°C
Cubeta: 1 cm
2 meses a -20°C
Método de dos reactivos – Inicio de sustrato
Deseche las muestras contaminadas.
CALIBRACIÓN Blanco de Reactivo Calibrador Muestra
USO PREVISTO Se recomienda calibración con calibrador XL MULTICAL, Cat. No. XSYS0034. Reactivo 1 0.800 ml 0.800 ml 0.800 ml
Reactivo de diagnóstico in vitro cuantitativo para la determinación cuantitativa de fosfatasa CONTROL DE CALIDAD
alcalina en suero o plasma humano. Muestra – – 0.020 ml
Para el Control de Calidad se recomienda ERBA NORM, Cat. No. BLT00080 y ERBA PATH,
SIGNIFICADO CLÍNICO Cat. No. BLT00081. Calibrador – 0.020 ml –
ALP humana consiste en un grupo de enzimas que hidrolizan los fosfatos a un pH alcalino. CONVERSIÓN DE UNIDADES Agua destilada 0.020 ml – –
ALP se encuentra en prácticamente todos los tejidos del cuerpo pero en altas concentraciones U/l x 0.017 = µkat/l Mezclar y añadir después de la incubación de 5 minutos (a 37° C) agregar:
en los osteoblastos del hueso, hígado, placenta, riñón, pared intestinal y glándulas mamarias
lactantes. En los adultos la ALP que se encuentra normalmente circulando en el suero se de- VALORES esperados 4 Reactivo 2 0.200 ml 0.200 ml 0.200 ml
riva en gran parte del hígado. En los niños o adolescentes, pasando por el desarrollo puberal, a 37°C
Mujeres: 4–15 años: 54–369 U/l Mezclar, incubar 1 min a 37 °C y luego medir la absorbancia inicial del calibrador y la muestra
hay un aporte adicional de hueso y esto representa un mayor rango de referencia para estos
20–50 años: 42–98 U/l contra el blanco del reactivo. Medir el cambio de absorbancia exactamente después de 1, 2
grupos. El embarazo también eleva los valores normales de fosfatasa alcalina.
≥ 60 años: 53–141 U/l y 3 min. Calcular el cambio de absorbancia en 1 minuto (ΔA/min).
Niveles elevados de ALP a menudo se observan en la enfermedad ósea o enfermedad del
hígado que involucra el tracto biliar. Si la fuente de la isoenzima no es evidente entonces la Hombres: 1–12 años: 54–369 U/l Método de Mono reactivo – Inicio de la muestra
medición de GGT puede ayudar a distinguir entre las dos. Una GGT elevada en presencia de 20–50 años: 53–128 U/l
ALP elevada sugeriría que el hígado es la fuente principal. ≥ 60 años: 56–119 U/l Blanco de Reactivo Calibrador Muestra
Aumento ALP (generalmente normal GGT) se observa en la Osteomalacia y raquitismo, hiper- Se recomienda que cada laboratorio verifique o derive un intervalo de referencia para la Reactivo de trabajo 1.000 ml 1.000 ml 1.000 ml
paratiroidismo primario que involucra el hueso, enfermedad de Paget, carcinoma secundario población que evalúa.
en hueso y en algunos casos de sarcoma osteogénico. El Niveles elevados de fosfatasa al- Muestra – – 0.020 ml
DATOS DE DESEMPEŇO
calina (generalmente con una elevada GGT) se observan en la colestasis, hepatitis, cirrosis, Los datos dentro de esta sección son representativos del desempeño en los sistemas ERBA Calibrador – 0.020 ml –
lesiones localizadas y procesos malignos que involucran hueso o hígado. Bajos niveles de XL. Los datos obtenidos en su laboratorio pueden diferir de estos valores.
fosfatasa alcalina pueden observarse en condiciones que causan el crecimiento óseo o en Agua destilada 0.020 ml – –
Límite de cuantificación: 4.5 U/l
Hipofosfatasia. Linearidad: 1300 U/l Mezclar, incubar 1 min a 37 °C y luego medir la absorbancia inicial del calibrador y la muestra
PRINCIPIO Rango de medición: 4.5–1300 U/l contra el blanco del reactivo. Medir el cambio de absorbancia exactamente después de 1, 2 y
El método según recomendación de IFCC. Este método utiliza 4-nitrofenil fosfato como sustrato. 3 min. Calcular el cambio de absorbancia en 1 minuto (ΔA/min).
Precisión intraensayo, promedio (n = 20) Media (U/l) SD (U/l) CV (%)
Bajo condiciones óptimas, la ALP presente en la muestra cataliza la siguiente reacción:
Muestra 1 84.2 0.58 0.69 CÁLCULO
ALP
AMP + 4-NPP + H2O 4-nitrophenol Δ Asam /min.
Muestra 2 217.8 2.34 1.07 1. ALP (U/l) = x Ccal Ccal = concentración del calibrador
Mg 2+ / Alcalino pH
4-nitrofenol tiene un color amarillo intenso al tener el pH de la reacción, El reactivo contiene Δ Acal /min.
Precisión inter-ensayo, promedio (n = 20) Media (U/l) SD (U/l) CV (%)
también un sistema de buffer de iones metálicos para asegurar que se mantenga la concen- 2. usando el factor:
tración óptima de magnesio y Zinc. El búfer de iones metálicos también puede quelatar otros Muestra 1 84.6 1.98 2.34
ALP (U/l) = f x ΔA/min
iones potencialmente inhibitorios que pueden estar presentes. La reacción se monitorea mi- Muestra 2 205.2 2.80 1.37 f = factor f = 2764 (a 405 nm)
diendo el aumento en la tasa de absorbancia a 405 o 415 nm y la cual es proporcional a la
actividad de fosfatasa alcalina en suero. COMPARACIÓN Aplicaciones para analizadores automáticos están disponibles a solicitud.
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO Una comparación entre fosfatasa alcalina de los sistemas XL (y) y una prueba disponible
PARÁMETROS DE ENSAYO PARA FOTÓMETROS
R1 comercialmente (x) usando 40 muestras dio los siguientes resultados:
Tampón de AMP, pH 10.4 434 mmol/l y = 0.965 x - 1.68 U/l Modo Cinética
Magnesio acetato 2.48 mmol/l r = 0.998 Longitud de onda (nm) 405
Mmol/l de sulfato de cinc 1.24 mmol/l INTERFERENCIAS Volumen de muestra (μl) 10/20
HEDTA 2.48 mmol/l Las sustancias siguientes no interfieren:
Reactivo de trabajo volumen (μl) 500/1000
R2 Hemoglobina hasta 5 g/l, bilirrubina hasta 40 mg/dl, triglicéridos hasta 2000 mg/dl.
p-nitrofenil fosfato 81.6 mmol/l Tiempo de espera (seg.) 60
WARNING AND PRECAUTIONS Intervalo cinético (seg.) 60
PREPARACIÓN DEL REACTIVO Para uso de diagnóstico in vitro. Para ser manejado por persona titulada y educada pro-
Reactivo líquido, listo para usar. fesionalmente. Reactivo R2 también contiene < 0.7 % KOH y está clasificado como irritante. No. de lecturas 3
ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO Factor cinético 2764
Los reactivos sin abrir son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la Temperatura (°C) de la reacción 37
botella y el estuche cuando se almacena a 2–8°C. Dirección de la reacción Aumento
Método de dos reactivos – inicio de sustrato
Reactivos están listos para usar. Después de abrir, los reactivos son estables hasta la fecha de Normal bajo U/l 42
caducidad de 2 a 8°C si está almacenado en condiciones apropiadas, tapado cuidadosamente Atención Normal alto U/l 128
y sin ninguna contaminación. Indicación de peligro: Linearidad baja U/l 4.5
La absorbancia máxima permisible del reactivo de trabajo medido a 420 nm frente agua de- H315 Provoca irritación cutánea Linearidad altaU/l 1300
stilada es 1.0. H319 Provoca irritación ocular grave
Método de Monoreactivo – inicio de la muestra Blanco con Reactivo
Consejo de prudencia:
Mezcle 4 partes del reactivo R1 con 1 parte del reactivo R2. P280 Usar guantes/ropa de protección/equipo de protección para los ojos. Límite de absorbancia (máximo) 1.4
Estabilidad: 1 semana de 15–25°C en la oscuridad P302+P352 EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua. Unidades U/l
4 semanas de 2–8°C en la oscuridad P305+P351+P338 EN CASO DE CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar con agua cuidado-
samente durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto cuando estén presentes y pueda
hacerse con facilidad. Proseguir con el lavado.

QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Fecha de revisión: 20. 3. 2018

 REFERENCES / ЛИТЕРАТУРА / LITERATURA / LITERATÚRA / REFERENCIAS
1. Z
 ilva JF, Pannall PR, “Plasma Enzymes in Diagnosis” in Clinical Chemistry in Diagnosis and Treatment. Lloyd
London 1979: Chapter 15 : 343.
2. IFCC method for the measurementof ALP J. Clin. Chem.Clin. Biochem. 1983: 21: 731-48.
3. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. Third Edition 1990 : 3 : 19-25.
4. Tietz Textbook of Clinical Chemisty and Molecular Diagnostics. Burtis, C.A., Ashwood, E.R., Bruns, D.E.; 5th
edition, WB Saunders Comp., 2012.
5. Kaplan and Pesce (Eds.) Clinical Chemistry, Theory analysis and correlation. Second Edition. CV Mosby Co. 1989.

USED SYMBOLS / ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ СИМВОЛЫ / POUŽITÉ SYMBOLY / UTILIZADOS SÍMBOLOS

Catalogue Number Manufacturer See Instruction for Use
Номер каталога Производитель Перед использованием
Katalogové číslo Výrobce Внимательно изучайте инструкцию
Katalógové číslo Výrobca Čtěte návod k použití
Código de Catalogo Fabricado por Čítajte návod k použitiu
Ver Instrucciones Para su Uso

Lot Number In Vitro Diagnostics Storage Temperature

Номер партии Ин витро диагностика Температура хранениа
Číslo šarže In vitro diagnostikum Teplota skladování
Número de Lote Dispositivo Médico para Teplota skladovania
Diagnóstico in Vitro Solamente Rango de Temperatura

Expiry Date Content Национальный знак

Срок годности Содержание соответствия для Украины
Datum expirace Obsah
Dátum expirácie Contenido
Fecha de Vencimiento

QUALITY SYSTEM CERTIFIED Erba Lachema s.r.o., Karásek 2219/1d, 621 00 Brno, CZ
ISO 9001 ISO 13485 e-mail: [email protected], www.erbamannheim.com
12000028
12000029

N/46/18/H1/INT Date of revision: 20. 3. 2018