Inclusion of Probiotic Strains Improves Immune Parameters in Broilers
Inclusion of Probiotic Strains Improves Immune Parameters in Broilers
Inclusion of Probiotic Strains Improves Immune Parameters in Broilers
*Autor para correspondencia: Jaime Eduardo Parra Suescn. Departamento de Produccin Animal, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad
Nacional de Colombia sede Medelln,. Bloque 50, oficina 320, Calle 59A No 63 20, Autopista Norte, Antioquia, Colombia, jeparrasu @unal.edu.co
1
Grupo Biodiversidad y Gentica Molecular BIOGEM, Departamento de Produccin Animal, Facultad de Ciencias
Agrarias, Universidad Nacional de Colombia, Medelln, Colombia. Calle 59A No 63 - 20 Autopista norte. Bloque 50,
Oficina 310.
Abstract
Broilers face pathogenic agents daily, which could trigger intestinal problems and cause the immune system to not
respond effectively. Probiotics improve natural defense mechanisms through the modulation of intestinal microbiota
(bactericide effect), which play a critical role in supporting the hosts health. The objective of this study was to
evaluate the inclusion of different probiotic strains in feeding broilers and its effect on the immune system. 125
one-day-old male chicks (Cobb) who underwent allometric analysis of lymphoid organs (bursa, thymus, spleen),
intestinal pH and antibody titer against gumboro was performed on days 7, 14, 21, 28, 35 and 42 (D1 and D2
respectively). Birds were fed two diets: basal diet with and without the addition of antibiotics. Probiotics (L. casei,
L. acidophilus or E. faecium) were supplied in the drinking water (108 UFC/ml) of animals fed the basal diet without
antibiotics (D2), representing the others experimental diets (D1, D2 and D3 respectively). The statistical design was
a randomized block split-plot arrangement. The inclusion of probiotics, specifically E. faecium, helped maintain
a lower intestinal pH, the greater weight of lymphoid organs and a greater degree of vaccine antibodies against
Gumboro, promoting animal health. Therefore, E. faecium, can be used in the feeding of broilers throughout the
production cycle as growth promoter.
Keywords:
Para citar este artculo: Chvez Gmez LA, Lpez Herrera A, Parra Suescn JE. La inclusin de cepas probiticas mejora los parmetros inmunolgicos
en pollos de engorde. Rev CES Med Zootec. 2015; Vol 10 (2): 160-169.
160 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
Resumen
Las aves se enfrentan diariamente a agentes patgenos que podran desencadenar problemas a nivel intestinal y
ocasionar que el sistema inmune no responda de manera efectiva. Los probiticos, pueden mejorar los mecanismos
de defensa naturales a travs de la modulacin de la microbiota intestinal (efecto bactericida), la cual desempea
un papel crtico en el mantenimiento de la salud del hospedero. El objetivo de este trabajo fue evaluar la inclusin
de diferentes cepas probiticas en la alimentacin de pollos de engorde y su efecto sobre el sistema inmune. Se
utilizaron 125 pollos machos (Cobb) de un da de edad a los cuales se les realiz anlisis alomtrico de rganos
linfoides (bursa, timo y bazo), pH intestinal y ttulo de anticuerpos contra gumboro los das: 14, 28, y 42. Las aves
fueron alimentadas con dos dietas: dieta basal con y sin la adicin de antibitico (D1 y D2 respectivamente). Los
diferentes probiticos (L. casei, L. acidophilus o E. faecium) se suministraron en el agua de bebida (108 UFC/ml) de
los animales que consumieron la dieta basal sin antibitico (D2), representando las dems dietas experimentales (D3,
D4 y D5 respectivamente). El diseo estadstico utilizado fue de bloques al azar en arreglo de parcelas divididas. La
inclusin de probiticos, especficamente E. faecium, ayudaron a mantener un pH intestinal ms bajo, y mayor peso
de los rganos linfoides y ttulos de anticuerpos post-vacunales contra gumboro, favoreciendo la salud del animal.
Por lo anterior, E. faecium, puede ser utilizado en la alimentacin de aves durante todo el ciclo productivo como
promotor de crecimiento.
Palabras clave:
Resumo
Os frangos enfrentam-se diariamente a agentes patgenos que poderiam desencadear problemas a nvel intestinal e
ocasionar que o sistema imunolgico no responda efetivamente. Os probiticos podem melhorar os mecanismos
naturais de defesas pela modulao da microbiota intestinal (efeito bactericida), a qual desempenha um papel critico
na mantena da sade do hospedeiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a incluso de deferentes estirpes probiticas
na alimentao de frangos de corte e seu efeito sobre o sistema imunolgico. Foram utilizados 125 frangos machos
(Cobb) de um dia de idade aos quais se foi realizado um analise allometric de rgos linfoides (Bursa, timo y bao),
pH intestinal e titulo de anticorpos contra o gumboro nos dias: 14, 28, y 42. Os frangos foram alimentados com duas
dietas: dieta basal com e sem a adio de antibiticos (D1 e D2 respectivamente). Os diferentes probiticos (L. casei,
L. acidophilus E. faecium) foram fornecidos na gua de bebida (108 UFC/ml) dos animais alimentados com a dieta
basal sem antibiticos (D2), representando assim as outras dietas experimentais (D3, D4 e D5 respectivamente). O
delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas. A incluso
de probiticos, especialmente E. faecium, ajudaram a manter o pH intestinal inferior, e um maior peso dos rgos
linfoides e os ttulos dos anticorpos ps a vacinao contra o gumboro, promovendo a sade dos animais. Portanto,
E. faecium, pode ser utilizado na alimentao dos frangos durante todo o ciclo de produo como um promotor de
crescimento.
Palavras chave:
Introduccin
La avicultura, especialmente el pollo de engorde, es inmunolgica han resultado perjudicados debido a la
una actividad que ha crecido significativamente a nivel aparicin de cepas bacterianas de E. coli, y Salmonella
mundial, y ha alcanzado grandes avances tecnolgicos (entre otras) cada vez ms patgenas y resistentes 13,18.
en las ltimas dcadas 23. La seleccin gentica para
aumentar la ganancia de peso de los animales ha Las bacterias pertenecientes a la microbiota intestinal
mejorado la conversin de alimento; sin embargo, el pueden ejercer una doble funcin, la estimulacin de los
desarrollo de rganos y tejidos relacionados a la respuesta mecanismos de defensa de la mucosa y el mantenimiento
161 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
162 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
Dieta 2 (D2): alimento comercial con antibitico, sin les realiz eutanasia humanitaria con dixido de carbono
adicin de cepa probitica en el agua de bebida. durante 3 minutos. Todas las aves fueron sacrificadas 2.5
horas despus de su ltima comida.
Dieta 3 (D3): alimento comercial sin antibitico, con
adicin de la cepa comercial probitica Lactobacillus Despus del sacrificio, las aves se pusieron en posicin
Acidophilus en el agua de bebida. ventral boca arriba, separando los miembros posteriores
y extendiendo las alas lateralmente; luego se realiz un
Dieta 4 (D4): alimento comercial sin antibitico, con corte que iba desde la parte anterior del cuello hasta la
adicin de la cepa comercial probitica Lactobacillus cloaca, intentando cortar solo la piel. Para la apertura de
Casei en el agua de bebida. la cavidad celmica se realiz un corte con las tijeras en
la zona que se encuentra por debajo de la pechuga. Se
Dieta 5 (D5): alimento comercial sin antibitico, con realizaron dos pequeos cortes laterales hasta llegar a las
adicin de la cepa comercial probitica Enterococcus costillas, y luego un corte de las costillas en direccin
faecium en el agua de bebida. craneal. En este instante se evalu la presencia de
exudados diversos y el estado de sacos areos 6.
Las dietas ofrecidas a los animales cumplieron con los
requerimientos mnimos nutricionales establecidos por Los rganos de la cavidad celmica se extrajeron
Rostagno (2011). Se elaboraron 2 dietas (Tabla 1), una conjuntamente. Se retir el tracto gastrointestinal con
para la etapa de iniciacin (da 1 al 21), y la otra para la el hgado y se separ el bazo. Luego de extraer el TGI
etapa de finalizacin (da 22 al 42). El alimento utilizado completo se ubic la Bursa en la regin cercana a la
en el estudio estuvo libre de antibiticos (excepto la dieta cloaca y se extrajo completa. De la regin del cuello se
D2), ya que no fue de inters modificar la dieta, sino la extrajo el Timo completo2. Todos los rganos extrados
incorporacin de los probiticos como una alternativa al fueron lavados con solucin salina fra, y luego fueron
uso de antibiticos. La cantidad de probitico adicionado pesados para el anlisis alomtrico21.
se realiz siguiendo las instrucciones para su preparacin
y adicin segn lo recomendado por el fabricante. La Anlisis alomtrico
inclusin de los probiticos en el agua de bebida se realiz
(dos veces al da) por mezclado directo de un litro de Los pesos de los rganos fueron convertidos a porcentaje
agua con 30 gramos de azcar comercial, para garantizar de peso vivo (%PV) por medio de la frmula:
poblaciones mnimas de 108 UFC/ml con una viabilidad
adecuada, la cual fue adicionada en un tanque de 20 lt de %PV = (Peso rgano 100)
agua, y evaluada por medio de anlisis microbiolgicos. (Peso promedio/ave)
163 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
Materia Prima Dieta Basal Dieta Basal + Dieta Basal Dieta Basal +
Iniciacin Antibitico Iniciacin Finalizacin Antibitico Finalizacin
% % % %
Maz 65,22 65,11 69,29 69,23
Torta de soya 28,22 28,22 14,19 14,19
Soya Frjol cocido 2,6 2,6 13 13
Carbonato de Calcio fino 1,37 1,37 1,23 1,23
Fosfato monoclcico 0,99 0,99 0,8 0,8
Aceite de Palma 0,5 0,5 0,5 0,5
Sal fina 0,33 0,33 0,33 0,33
DL-Metionina 0,18 0,18 0,14 0,14
L-Lisina HCL 0,15 0,15 0,11 0,11
GFC Broiler Premix 1.2 P 0,12 0,12 0,12 0,12
Bicarbonato de sodio 0,1 0,1 0,08 0,08
Atrapante de Micotoxina 0,09 0,09 0 0
(Mycofix Secure)
Cloruro de Colina 60 % 0,07 0,07 0,05 0,05
Zinc Bacitracina 15% 0 0,05 0 0
Maduramicina 0.75% 0 0,05 0 0
& Nicarbazina 8%
Sulfato de Cobre 25% 0,04 0,04 0,04 0,04
Tryptophan 0,02 0,02 0,01 0,01
Neomicina 50% 0 0,02 0 0
L-Treonina 0,01 0,01 0,12 0,12
Salinomicina 12 % 0 0 0 0,05
Enramicina 8% 0 0 0 0,01
Colistina 50% 0 0 0 0,01
EM: Energa Metabolizable (Kcal/Kg); PC: Protena Cruda (%); EE: Extracto Etreo (%); FC: Fibra Cruda (%)
Para la determinacin del pH intestinal se tom 1 g de la mezcla un electrodo de pH y se realizaron las lecturas
muestra (mezcla) de contenido de duodeno, yeyuno, en un potencimetro con precisin de tres decimales. El
leon y ciegos, para luego suspenderla en 12,5 ml de agua pH de la suspensin fue medido dentro de los 45 minutos
destilada desionizada. Esta mezcla se agit manualmente subsiguientes al sacrificio de las aves 12.
con agitador de vidrio lavndolo despus de cada
registro con agua destilada. Posteriormente se insert en
164 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
165 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
D1: Alimento comercial sin probitico y Sin antibitico; D2: Alimento comercial + antibitico; D3: Alimento comercial sin antibitico
+ L. acidophilus; D4: Alimento comercial sin antibitico + L. casei; D5: Alimento comercial sin antibitico + E. faecium.
(Peso rgano 100)
%PV = (Peso promedio/ave)
CA= (On / Oh) / ( PCn / PCh); Donde: O= peso del rgano; n= das despus del nacimiento; h= peso al nacimiento y PC= peso
corporal. CA<1: crecimiento lento con relacin al peso corporal. CA=1: crecimiento proporcional con relacin al peso corporal. CA>1:
crecimiento rpido con relacin al peso corporal
A,B,C,D,E
Dentro de una misma fila medias con un superndice comn no difieren estadsticamente (P < 0.05).
EEM: Error estndar de la media.
166 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
los diferentes perodos de tiempo evaluados, y present Stringfellow et al., 24 reportaron que el suministro de
su peso mximo el da 42, indicando que los animales se probiticos en el agua de bebida de pollos de engorde
encontraban en un ambiente tolerable por ellos 5,14,19. El mejoraron los ttulos de anticuerpos post-vacunales,
aumento en el tamao de estos rganos, especialmente debido a que las bacterias probiticas activan el sistema
de la bursa la cual contiene numerosos linfocitos B, y del inmune de la mucosa a travs de la estimulacin de
timo en el que se encuentran los linfocitos T, permiten las clulas presentadoras de antgeno para promover
una mejor respuesta inmune 9,20. la proteccin. La administracin de probiticos puede
ofrecer una mayor proteccin en el momento de la
El uso de probiticos en la alimentacin de aves vacunacin o tener un efecto adyuvante modulando el
tiene ventajas considerables en comparacin con los sistema inmune del hospedero 24. Salim y colaboradores 22
aditivos antibacterianos, debido a que estos no inducen reportaron que se present mayor cantidad de anticuerpos
resistencia a los antibiticos, no son txicos y por tanto en pollos alimentados con probiticos en comparacin
no producen efectos secundarios indeseables cuando con el control debido a que los probiticos aumentan
son utilizados en la alimentacin; adems, en el caso de la respuesta humoral, mejorando la funcin inmune y
animales destinados al consumo, no se producen residuos promoviendo la sntesis de pptidos antimicrobianos
txicos en la canal 8. Las aves que consumieron D5 (E. endgenos en el intestino, lo que se ve reflejado en
faecium) presentaron un pH ms bajo en comparacin animales ms sanos.
con los dems tratamientos, debido principalmente a
que estos microorganismos crecen rpidamente en el La inclusin de probiticos como promotores de
intestino, y provocan un descenso del pH que funciona crecimiento, especficamente L. acidophilus y E. faecium,
como un antisptico del sistema digestivo, y al mismo en la alimentacin de pollos de engorde, influyen en el
tiempo minimiza la proliferacin de microorganismos peso de rganos linfoides y pH intestinal, lo cual se vi
patgenos al competir por nutrientes y espacio en las reflejado en la mayor produccin de anticuerpos post-
paredes intestinales 7. La disminucin en el pH intestinal vacunales, lo que podra favorecer la salud del animal, y a
se produce debido a la fermentacin por parte de la su vez, influir de manera positiva sobre el bienestar de las
microbiota, la cual aumenta la produccin de cidos aves. Por lo anterior, E. faecium, puede ser utilizado en
grasos de cadena corta 1,8,15. la alimentacin de aves durante todo el ciclo productivo
como promotor de crecimiento.
Los probiticos en el organismo de un animal sano
pueden estimular la respuesta inmune no especfica y Referencias
mejorar la proteccin inmune; adems, pueden mejorar
los niveles de IgA a nivel intestinal, lo que repercute en 1. Abdelqader A, Al-Fataftah A-R, Da G. Effects of
un efecto positivo sobre el crecimiento, la produccin dietary Bacillus subtilis and inulin supplementation
y la capacidad de resistencia a las enfermedades 3,9,17,20. on performance, eggshell quality, intestinal
Los ttulos de anticuerpos vacunales contra gumboro morphology and microflora composition of laying
presentaron diferencias (P<0,05) segn el tipo de dieta hens in the late phase of production. Anim. Feed
que consumieron las aves, donde las que consumieron Sci. Technol. 2013;179(1-4):103-111. doi:10.1016/j.
Dy D2 presentaron los menores valores, mientras que anifeedsci.2012.11.003.
las aves que fueron adicionadas con D5 (E. faecium)
presentaron un mayor ttulo de anticuerpos contra 2. Acevedo M. Tcnica de necropsia en aves. In: Mem.
gumboro, demostrando que el uso de bacterias acido Conf. Interna Med. Aprovech. Fauna Silv. Ext.
lcticas ayuda al desarrollo y maduracin del sistema Conv.; 2012:4-15.
inmune, incrementando la produccin de anticuerpos
16
. En este trabajo los ttulos de anticuerpos vacunales 3. Butel M. Probiotics, gut microbiota and health.
contra gumboro presentaron un descenso entre el da 14 Mdecine Mal. Infect. 2014;44(1):1-8. doi:10.1016/j.
y 28 (Tabla 2) a pesar de las vacunaciones en incubadora medmal.2013.10.002.
y en campo. Este fenmeno puede explicarse como la
consecuencia de la interferencia de los anticuerpos 4. Chambers JR, Gong J. The intestinal microbiota and
maternales con la respuesta inmune a la vacunacin, ya its modulation for Salmonella control in chickens.
que la inmunidad pasiva genera una incapacidad de la Food Res. Int. 2011;44(10):3149-3159. doi:10.1016/j.
progenie de responder adecuadamente a las vacunaciones foodres.2011.08.017.
19
.
167 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
5. Corts L, Villamarin S. Caractersticas morfomtricas 14. Li SP, Zhao XJ, Wang JY. Synergy of Astragalus
de rganos linfoides y estudios serolgicos en levante polysaccharides and probiotics (Lactobacillus
de ponedoras utilizando un inmunomodulador , and Bacillus cereus) on immunity and intestinal
vitaminas y aminocidos. Spei Domus 2013;9(18):29- microbiota in chicks. Poult. Sci. 2009;88(3):519-25.
36. doi:10.3382/ps.2008-00365.
6. Dolz R, Maj N. Atlas de Necropsia Aviar. Zaragoza, 15. Lutful Kabir SM. The role of probiotics in the
Espaa: Servet; 2011:96. poultry industry. Int. J. Mol. Sci. 2009;10(8):3531-
46. doi:10.3390/ijms10083531.
7. Franz CM a P, Huch M, Abriouel H, Holzapfel
W, Glvez A. Enterococci as probiotics and 16. Machado LSC, Jurado SCV. Caractersticas
their implications in food safety. Int. J. Food morfomtricas de rganos linfoides y estudios
Microbiol. 2011;151(2):125-40. doi:10.1016/j. serolgicos en levante de ponedoras utilizando un
ijfoodmicro.2011.08.014. inmunomodulador , vitaminas y aminocidos. Spei
Domus 2013;9(18):29-36.
8. Gagga F, Mattarelli P, Biavati B. Probiotics and
prebiotics in animal feeding for safe food production. 17. Musa HH, Wu SL, Zhu CH, Seri HI, Zhu GQ.
Int. J. Food Microbiol. 2010;141 Suppl :S15-28. The Potential Benefits of Probiotics in Animal
doi:10.1016/j.ijfoodmicro.2010.02.031. Production and Health. J. Anim. Vet. Adv.
2009;8(2):313-321.
9. He J, Zhang KY, Chen DW, Ding XM, Feng GD,
Ao X. Effects of vitamin E and selenium yeast on 18. Ohimain E, Ofongo R. The Effect of Probiotic and
growth performance and immune function in ducks Prebiotic Feed Supplementation on Chicken Health
fed maize naturally contaminated with aflatoxin B1. and Gut Microflora: A Review. J. Anim. Vet. Adv.
Livest. Sci. 2013;152(2-3):200-207. doi:10.1016/j. 2012;4(2):135-143.
livsci.2012.12.018.
19. Perozo F, Nava J, Mavrez Y, Arenas E, Serje P,
10. Huyghebaert G, Ducatelle R, Van Immerseel F. Briceo M. Caracterizacin morfomtrica de los
An update on alternatives to antimicrobial growth rganos linfoides en pollos de engorde de la lnea
promoters for broilers. Vet. J. 2011;187(2):182-8. ross criados bajo condiciones de campo en el estado
doi:10.1016/j.tvjl.2010.03.003. Zulia, Venezuela. Rev. Cientfica 2004;14(3):1-18.
11. Ingrao F, Rauw F, Lambrecht B, van den Berg T. 20. Rajput IR, Li LY, XXin XX, et al. Effect of
Infectious Bursal Disease: a complex host-pathogen Saccharomyces boulardii and Bacillus subtilis B10
interaction. Dev. Comp. Immunol. 2013;41(3):429- on intestinal ultrastructure modulation and mucosal
38. doi:10.1016/j.dci.2013.03.017. immunity development mechanism in broiler
chickens. Poult. Sci. 2013;92:956-965. doi:dx.doi.
12. Jaramillo A. Evaluacin de la mezcla de un org/ 10.3382/ps.2012-02845.
cido orgnico y un prebitico en los parmetros
productivos y alomtricos de pollos de engorde con 21. Reis S, Guerrero C, Aguilera B, Mariscal L. Efecto
alimentacin controlada. Rev. Colomb. Cienc. Anim. de diferentes cereales sobre la morfologa intestinal
2012;5(1):52-66. de lechones recin destetados. Tc Pecu Mex
2005;43:309-321.
13. Korver DR. Implications of changing immune
function through nutrition in poultry. Anim. Feed 22. Salim HM, Kang HK, Akter N, et al. Supplementation
Sci. Technol. 2012;173(1-2):54-64. doi:10.1016/j. of direct-fed microbials as an alternative to antibiotic
anifeedsci.2011.12.019. on growth performance, immune response, cecal
microbial population, and ileal morphology of
broiler chickens. Poult. Sci. 2013;92(8):2084-90.
doi:10.3382/ps.2012-02947.
168 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607
Chvez Gmez, LA et al. Cepas probiticas y los parmetros inmunolgicos en pollos de engorde
23. Stewart CR, Keyburn AL, Deffrasnes C, Tompkins 25. Tellez G, Pixley C, Wolfenden RE, Layton SL, Hargis
SM. Potential directions for chicken immunology BM. Probiotics/direct fed microbials for Salmonella
research. Dev. Comp. Immunol. 2013;41(3):463-8. control in poultry. Food Res. Int. 2012;45(2):628-
doi:10.1016/j.dci.2013.05.011. 633. doi:10.1016/j.foodres.2011.03.047.
169 Revista CES Medicina Veterinaria y Zootecnia / Volumen 10 / Nmero 2 / julio diciembre de 2015 / ISSN 1900-9607