O Núcleo

O núcleo é o cérebro da célula. Este possui todas as informações genéticas e

comanda toda a célula. Dentro do núcleo encontramos o DNA que é responsável por
todas as características de um ser vivo, e ainda, é responsável pela produção de
proteínas, a forma da célula, etc.

Composto por:
 Membrana: possui vários poros compostos por uma estrutura proteica que
funciona como uma válvula que escolhe que substâncias entrar e quais as que
saem.
 Cromatina: conjunto de fios formados por uma molécula de DNA associada a
histonas chamados cromossomas.
 Nucléolo: corpo redondo e denso, constituído por proteínas, RNA e DNA.

Os genes expressos para serem ativos precisam que a informação contida nas
sequências de DNA seja descodificada.
O intrões são removidos do mRNA por um processo denominado splicing.

As principais funções do núcleo consistem em manter e replicar o genoma, regular a

transcrição dos genes e controlar o processamento dos RNA daí resultantes.

Células Eucarióticas vs Células Procarióticas

Nas células eucarióticas existe um núcleo individualizado , ao contrário das células

procarióticas que possuem um nucleoide.
O núcleo funciona como um reservatório de informação genética e também como
centro de controlo da célula.
O processamento e a síntese de RNA apesar de ocorrerem no núcleo, a sua tradução
em proteínas ocorre no citoplasma.

O núcleo é envolvido por duas unidades de

membrana
Invólucro Nuclear:

 Separa os conteúdos do núcleo e do citoplasma;

 Assegura a forma do núcleo;
 Constituído por duas membranas nucleares rodeadas pela lamina nuclear
e pelos poros (membrana externa: início do RER);
 Membrana dupla que previne a passagem livre de moléculas entre o
núcleo e o citoplasma;
  Possui poros nucleares;
 Funções: transporte nucleocitoplasmático, papel relevante na expressão
genica em eucariontes, organização espacial da cromatina e replicação do
DNA.

Lâmina Nuclear:
 Associada á membrana interna do invólucro nuclear;
 Interfase estrutural e funcional entre a membrana nuclear interna e a
cromatina;
 Promove a ancoragem do poro nuclear ao invólucro;
 Filamentos de 10 nm, constituindo uma rede de filamentos intermédios

Poros Nucleares:
 São os únicos canais através dos quais pequenas molecas polares , iões e
macromoléculas podem atravessar o núcleo e o citoplasma;
 Diâmetro: 120 nm;
 Constituídos por cerca de 50 - 100 proteínas diferentes;
 Função: controla o tráfego de moléculas entre o núcleo e o citoplasma.

Cromatina:
 Duplo filamento helicoidal de DNA associado a proteínas (histona).
 DNA + histonas = nucleossomo;
 Dois tipo:
o Heterocromatina: inativa, pois a hélice de DNA, durante a interfase, está
compactada e não é transcrita; Em parte, corresponde a genes
silenciados;
o Eucromatina: ativa, os genes são transcritos, pois a hélice de DNA não
está condensada.

Nucléolo:
 a sub-estrutura maior do núcleo;
 Local de síntese e processamento do rRNA e montagem dos ribossomas;
 Está associado com as regiões dos cromossomas que contem os genes que
codificam rRNA 5,8s , 18s, 28s;
 Transcrição do rRNA 5s da subunidade 60s ocorre fora do núcleo;
 Agregado de genes de rRNA, precursores de enzimas de processamento e de
subunidades proteicas de RNA. Esta associação sugere que o nucléolo seja o
local de montagem dos ribossomas.
Estrutura:
 3 regiões distintas: centro fibrilar, componente fibrilar denso, e componente
granular.

Montagem dos ribossomas:

 A síntese dos ribossomas envolve a associação dos rRNAs com proteínas
ribossomais e com rRNA 5s sintetizado fora do nucléolo.

Matriz Nuclear:
 Sob a membrana interna do núcleo existe uma rede fibrosa composta por
denominadas laminas;
 Papel de replicação do DNA, regulação da transcrição;
 Funciona como esqueleto para os cromossomas na interfase.

Nucleoplasma: preenche o espaço entre componentes do núcleo, p.e., a cromatina e o

nucléolo.

Transporte seletivo de RNA:

A maioria dos RNAs são exportados do núcleo para o citoplasma como complexos
ribonucleicoproteína(RNPs), por outro lado , a maioria das proteínas são transportadas
do citoplasma para o núcleo. Como as proteínas são sintetizadas no citoplasma esta
exportação é um passo critico na expressão génica dos eucariontes. A exportação dos
RNAs através dos poros nucleares constitui um processo ativos, depende de energia
(está dependente de GTP-Ran). Algumas proteínas têm sinais que são reconhecidos
pelos recetores de transporte nuclear.
 Proteínas responsáveis pela estrutura genómica e função:
o Histonas;
o DNA polimerases;
o RNA polimerases;
o Fatores de transcrição.

Ex: Os RNAs ribossómicos associam-se com proteínas no nucléolo e as subunidades 40s

60s são transportadas para o citoplasma através dos poros nucleares.

Organização interna do núcleo:

o Durante a interfase há regiões dos cromossomas diferentemente

condensadas: Heterocromatina e eucromatina.

Embora a eucromatina pareça distribuída de forma homogénea, os cromossomas

interfrásicos estão dispostos num arranjo organizado. A distribuição não aleatória da
cromatina desempenha um papel importante na regulação da expressão génica.
O núcleo durante a mitose:
No inicio da mitose os cromossomas condensam, o nucléolo desaparece e o
involucro nuclear desintegra-se, o que leva á libertação dos componentes do
núcleo no citoplasma. No fim desta, o processo é revertido.

 A evolução da mitose é controlada essencialmente pela fosforilação reversível e

desfosforilação de proteínas nucleares (ação reguladora da proteína cinase
Cdc2).

1. Dissolução do involucro nuclear durante a mitose:

Na maioria das células marca o fim da prófase. (“open mitosis”).

> “close mitosis”: o invólucro nuclear permanece intacto (ex: em leveduras).

 Envolve as seguintes modificações:

1. A membrana nuclear é fragmentada em vesículas;

2. Os poros nucleares dissociam-se;

3. A lamina nuclear despolimeriza.

2. Condensação da cromatina durante a mitose:

A cromatina interfásica empacotada em nucleossomas condensa-se para formar

cromossomas compactos. Esta condensação é necessária para permitir o movimento dos
cromossomas como unidades intactas ao longo do fuso mitótico. O DNA encontra-se
altamente condensado não podendo ser transcrito. Por fim, ocorre a fosforilação da
histona H1 por ação da proteína cinase Cdc2.

Unidade básica da cromatina: o nucleossoma

3. Reconstrução do núcleo interfásico:

No fim da mitose formam-se dois núcleos á volta dos dois conjuntos de cromossomas.
A descondensação dos cromossomas e a reconstrução do invólucro nuclear é sinalizada
pela inativação da proteína Cdc2. A inativação desta proteína conduz à desfosforilação
das proteínas fosforiladas no inicio da mitose.

O primeiro passo associado à reconstrução do involucro nuclear consiste na ligação de

vesiculas (que foram formadas durante a quebre da membrana nuclear) á superfície dos
cromossomas (mediada por laminas e proteínas de membrana integrais da m.i.n).

DNA
 Cada molécula de DNA constituinte de um cromossoma tem um centrómero, dois
telómeros e origens de replicação.

Cromossoma: é uma molécula de DNA linear com funções de replicação e propagação

para a geração seguinte. A informação total é o genoma.

Não há relação entre número de cromossomas, complexidade da espécie e tamanho do

genoma.

Cada gene produz uma molécula de RNA funcional (mRNA, rRNA ou tRNA).

O DNA dos cromossomas está “empacotado” através da associação a histonas.

Histonas: proteínas com elevada proporção de aa com carga positiva (lisina e arginina)
que participam no enrolamento do DNA na formação de nucleossomas.

Cromatina: DNA + proteínas

Através do ciclo celular, os cromossomas atravessam diferentes estados de

condensação. Os cromossomas mitóticos são resultantes de vários níveis de
empacotamento da cromatina.

Durante a interfase, a eucromatina é alterada localmente, permitindo a transcrição. A

eucromatina são fibras de 30 nm com enrolamentos a partir de um suporte proteico. Em
arcos de fibra de 30 nm salientes há descondensação, permitindo a expressão dos genes
aí contidos.

Replicação de DNA:

 Semi-conservativa e bidirecional.

1. DNA linear de vírus- adenovírus;

2. Alguns plasmídeos bacterianos;
3. Mecanismo geram em procariontes e eucariontes.

Genoma humano replica-se em 8h

A replicação em cadeia dupla requer a participação de muitas proteínas:

 DNA polimerases:

1. Não desnaturam o DNA;

2. Não iniciam a síntese de cadeias , apenas alongam;

3. 5` 3`, ao contrário é exonuclease;

 4. Localização: núcleo e mitocôndrias.

 Algumas proteínas necessárias na replicação:

1. DNA helicase;

2. DNA primase;

3. DNA ligase.

Contudo, existe um problema no final de cada replicação!! – Os telómeros encurtam

50-200pb em cada divisão celular. Os telómeros são a parte final.

Para compensar a erosão dos telómeros há uma síntese compensatória de (TTAGGG)n

pela telomerase (previne o encurtamento progressivo dos telómeros).

Telomerase: complexo ribonucleoproteico que catalisa o alongamento da cadeia molde.

Transcriptase reversa.

Evolução de genomas:

As sequências de genes são mais conservadas entre espécies do que a estrutura

global do genoma (tamanho do genoma, no de cromossomas, sequências de DNA
repetitivo, etc.).

Erros provocados por:

• replicação de DNA, recombinação de DNA e reparação de DNA podem causar

subsituições de um nucleótido ou supressões, duplicações, inversões e translocações;

• elementos de DNA móvel (transposões) causam rompimento de sequência de genes e

fusão de partes de genes criando novos genes.

A diferença de sequência de genomas é diretamente proporcional ao

tempo de divergência evolutiva.