PRÁCTICA NÚCLEO DE LA CÉLULA: estudiar la morfología de los glóbulos rojos,

DETERMINACIÓN DE LA plaquetas y leucocitos en sangre periférica y médula

9 CROMATINA SEXUAL ósea. En general la coloración con el reactivo de

Wright da lugar a coloraciones más rojizas al
disminuir el pH del agua tamponada utilizada.
I. INTRODUCCIÓN Resultados
Los objetivos son: OBSERVACIÒN DE FORMAS DE NUCLEO Y
- Reconocer las diferentes formas nucleares en PALILLOS DE TAMBOR: sangre periférica
tejido sanguíneo.
- Ubicar e identificar los palillos de tambor en los
leucocitos neutrófilos.
- Reconocer la cromatina sexual en núcleos
interfásicos de la mucosa labial.
- Conocer la importancia de los palillos de tambor
y cuerpo de Barr en la determinación del sexo.

II. MATERIAL Y MÉTODO

2.1 Material, equipos y reactivos:
- Muestra de mucosa labial y sangre periférica
- Microscopio compuesto
- Laminas portaobjetos y cubreobjetos, Gradillas,
Pipetas Pasteur, Lancetas, agujas descartables,
Palillos mondadientes, Vasos de precipitación,
Frascos de coloración , anticoagulante.
- Colorante carbol-fucsina, Colorante Wright (0.3g
colorante en 3ml de glicerina y 97 ml metanol),
Aceite de cedro, Xilol, Buffer fosfato pH: 7.2 (agua
tamponada), Alcohol absoluto 95%
2.2 Método
OBSERVACIÒN DE FORMAS DE NUCLEO Y
PALILLOS DE TAMBOR : sangre perifèrica
Obtención de la muestra.
- De la vena, con una aguja descartable,extraer 2 ml Discusión:Palillos de tambor
de sangre y colocarla en un frasco con Características:Tamaño: 1.5 µm de diámetro
anticoagulante. Forma: Pequeño apéndice (cromatina sexual)
- También la muestra puede ser extraída por Los núcleos se teñirán en diferentes tonos de violeta
punciòn,de la yema o pulpejo del dedo anular azulado (púrpura). (el citoplasma se teñirá en
izquierdo, con una lanceta diferentes tonos de azul a rosa claro
- Colocar una gota de sangre en una lámina y hacer Nucleo y citoplasma: El extremo bulbosos denso esta
la extensión de la sangre con un movimiento suave unido al nucleo por un filamento muy tenue,
y firme. compuesto tan solo por membrana nuclear, teñido
- Dejar secar al medio ambiente durante 1 a 3 debilmente.
minutos. Eritrocitos: Color rosa o rosa - anaranjado.
- Coloración:Cubrir el frotis completamente con el Plaquetas: Color violeta pálido o púrpura.
colorante de WRIGHT durante 5 minutos. Neutrófilos: Núcleo violeta oscuro. Citoplasma rosado
- Sin tirar el colorante agregar el buffer de fosfatos ph con granulaciones
7.2 durante 5 minutos. rojo violeta.
- Desechar el colorante y lavar conmla sol. Buffer o Eosinófilos: Núcleo violeta. Citoplasma azul con
con agua corriente. Secar al calor moderado gránulos rojos o rojo anaranjado.
- observar al microscopio con el objetivo de Basófilos: Núcleo azul oscuro o púrpura. Gránulos
inmersión, previamente colocar una gota de aceite púrpura casi negros.
de cedro. Linfocitos: Núcleo púrpura. Citoplasma azul celeste.
Colorante Wright Monocitos: Núcleo laxo violeta. Citoplasma azul
Esta coloración es policromática, lo que quiere decir celeste.
que genera varios colores dependiendo de la Patología: Presente en las mujeres ya que permite
estructura que absorbe el colorante. Esta técnica de conocer el sexo del individuo mediante una simple
coloración ha sido muy utilizada para realizar observación en un frote de sangre periférica en los
recuentos diferenciales de glóbulos blancos y neutrófilos.
OBSERVACION DE CUERPOS DE BARR
(MUCOSA LABIAL):
Obtencion de la muestra:
- Realizar enguajes y raspados de la cavidad bucal
con agua tibia.Desechar este primer raspado y
enjuages por el alto contenido de bacterias.
- Con otro hisopo, con más intensidad hacer un nuevo
raspado en la misma zona y extenderla sobre otra
lámina porta objeto.
- Fijar el preparado al calor moderado a fin de evitar la
destrucción de las células.
- Fijación: colocar la lámina en una placa Petri y
cubrir con alcohol 96% (fijación) durante 30 minutos.
Dejar secar al aire.
- Coloraciòn:La técnica de coloración que se utiliza
es la de carbol fucsina que consiste en:
- Cubrir el preparado con carbol-fucsina por 5-10
minutos.
- Desechar el colorante e introducir el preparado en Discusión:Los Corpúsculos o cuerpos de Barr,
agua tamponada pH 7.2 por 1 minuto. también llamados cromatina sexual X, son una masa
- Sumergir la preparación en etanol al 96% durante 1 heterocromática, plana y convexa, con un tamaño de
minuto. 0,7x1,2 micras, que se encuentran en el núcleo de las
- Sumergir la preparación en etanol absoluto durante 1 células somáticas de las hembras de algunos
minuto. animales. Se forman por la condensación de la
- Aclarar con Xilol por un minuto cada uno (repetir) cromatina sexual de uno de los cromosomas X, que
- Secar al calor moderado. se inactiva debido al proceso llamado lionización en
- Observar con el objetivo de inmersión las cél. animales donde el sexo se determina con la
epiteliales e identificar los cuerpos de Barr. presencia o ausencia del cromosoma Y.
- Esquematizar. La cromatina sexual se encuentra en los núcleos
Resultados interfásico de las células y puede ocupar diferentes
OBSERVACION DE CUERPOS DE BARR posiciones dentro de éstos dependiendo del tipo de
(MUCOSA LABIAL): tejido. En las células tejido epitelial de la mucosa
bucal se encuentra pegado a la membrana interna del
núcleo (Fig. 3). En un frotis sanguíneo se puede
identificar en los leucocitos Neutrófilos o
polimorfonucleares en forma de palillo de tambor
(Drumstick) por su forma como una prolongación de
uno de los lóbulos de dichas células sanguíneas (Fig.
4). También puede observarse fácilmente en
preparaciones citológicos de raíz de cabello y en
Neuronas (suspendida en el jugo nuclear) donde
originalmente fue identificada. En general se observa
en cualquier tejido cuyas células tengan núcleos
grandes y con cromatina dispersa.
El estudio de la cromatina sexual, en especial de
células de la mucosa oral, nos permite identificar la
presencia del cromosoma X en recién nacidos con
genitales externos no definidos para obtener el
diagnóstico de sexo en un individuo con Desórdenes
del desarrollo sexual.
En las células con dos cromosomas X o más, sólo
uno de ellos se encuentra laxo y disperso en el núcleo
mientras que los restantes se encuentran en estado
condensado por lo que se tiñen más intensamente, a
los individuos que lo presentan se les denomina
cromatina positivos.