SDS-PAGE i masenom spektrometrijom proteina HeLa ćelija, Gustafson et al. (2005) identificirali su ZCCHC8, koji je unakrsno reagovao sa antitijelom usmjerenim na GSK3 mesto fosforilacije u MYC. CCHC domen ZCCHC8 uglavnom se nalazi u proteinima koji vežu nukleinske kiseline. U ljudskim ćelijskim linijama, ZCCHC8 se lokalizirao u jedru, ali je isključen iz nukleolusa. Imao je prividnu molekulsku masu od 105 kD, pomoću SDS-PAGE.[9]
Gustafson et al. (2005) utvrdili su da je ZCCHC8 u ljudskim ćelijama i ćelijskim linijama fosforiliran na thr492 (T492). Ukupni nivoi ZCCHC8 blago su porasli kako su ćelije ušle u S-fazu, ali se fosforilacija T492 povećala tek kada su ćelije ušle u mitozu. Inhibicija GSK3, tretmanom litijem ili kotransfekcija domena u interakciji AXIN (AXIN1) GSK3 uveliko smanjuje fosforilaciju ZCCHC8 T492. Koristeći ZCCHC8 kaosondu u tandemskom afinitetskom prečišćavanju lizata ćelija HeLa, nakon čega slijedi SDS-PAGE i masena spektrometrijska analiza, otkrili su da je ZCCHC8 bio u interakciji s faktorom prerade RNK RBM7 i s DExH kutijskom RNK-helikazom SKIV2L2. Kotransfekcija ćelija HeLa potvrdila je da je ZCCHC8 bio u interakciji sa epitopom označenim kao RBM7 i SKIV2L2.
Gable et al. (2019) otkrili su da je destrukcija ZCCHC8 u HeLa ćelijama, pomoću shRNK rezultiralo smanjenjem razine TERC -a. Dodatne detaljne ćelijske studije pokazale su da je ZCCHC8 potreban za sazrijevanje TERC-a i funkciju telomeraza, posebno posreduje u ciljanju primarnog kraja TERC 3 prema egzosomu jedarne RNK.
U tri člana porodice sa plućnom fibrozom povezanom sa telomerama i/ili zatajenjem koštane srži-5 (PFBMFT5; 618674), Gable et al. (2019) identificirali su heterozigotnumisens mutaciju u genu ZCCHC8 (P186L). Mutacija, koja je pronađena kombinacijom analize vezanosti i sekvenciranja cijelog genoma i potvrđena Sangerovim sekvenciranjem, odvojena je od poremećaja u porodici. Dva mlađa asimptomska člana porodice koja su imala kratke telomere također su nosila mutaciju. Mutacija nije pronađena u bazama podataka 1000 Genomes Project, Exome Sequencing Project, ExAC ili gnomAD. Analiza ćelija pacijenata pokazala je 50% smanjenje nivoa proteina ZCCHC8 u odnosu na kontrole, što ukazuje na to da je mutacija ugrozila stabilnost proteina. Ćelije pacijenata također su pokazale disregulaciju obrade RNK, s abnormalnom akumulacijom prekursora TERC-a na račun zrelog TERC-a.
Gable et al. (2019) otkrili su da je homozigotni gubitak Zcchc8 kod miševa rezultirao postnatalnom smrtonosnošću za 70 dana. Zcchc8-nula miševi pokazali su progresivne neurorazvojne nedostatke, s malim volumenom mozga, defektnom neurogenezom i hidrocefalusom. Neke od karakteristika bile su u skladu s ciliopatijom. Ove abnormalnosti bile su povezane s neispravnim prijenosom transkripata RNK-polimeraze II s niskim sadržajem i nenormalnom akumulacijom dugolančanih RNK s niskim sadržajem, uključujući histone i RNK koji kodiraju proteinske komponente cilija. Nalazi su bili u skladu s disregulacijom obrade RNK.[10]
^Gustafson, M. P., Welcker, M., Hwang, H. C., Clurman, B. E. Zcchc8 is a glycogen synthase kinase-3 substrate that interacts with RNA-binding proteins. Biochem. Biophys. Res. Commun. 338: 1359-1367, 2005. PubMed: 16263084
^Gable, D. L., Gaysinskaya, V., Atik, C. C. Talbot, C. C., Jr., Kang, B., Stanley, S. E., Pugh, E. W., Amat-Codina, N., Schenk, K. M., Arcasoy, M. O., Brayton, C., Florea, L., Armanios, M. ZCCHC8, the nuclear exosome targeting component, is mutated in familial pulmonary fibrosis and is required for telomerase RNA maturation. Genes Dev. 33: 1381-1396, 2019. PubMed: 31488579
Gustafson MP, Welcker M, Hwang HC, Clurman BE (2006). "Zcchc8 is a glycogen synthase kinase-3 substrate that interacts with RNA-binding proteins". Biochem. Biophys. Res. Commun. 338 (3): 1359–67. doi:10.1016/j.bbrc.2005.10.090. PMID16263084.
Matsuoka S, Ballif BA, Smogorzewska A, et al. (2007). "ATM and ATR substrate analysis reveals extensive protein networks responsive to DNA damage". Science. 316 (5828): 1160–6. doi:10.1126/science.1140321. PMID17525332. S2CID16648052.
